定坤丹的一般服用方法为：在每次月经来之前3天开始服用，服用6天停止，为一个疗程，下个月经期来之前的3天又重新开始服用。一般要坚持三个疗程。一次半丸至1丸，一日2次，而且要用温开水送服。
值得注意的是：1、在服用定坤丹的期间要忌止吃一些生冷、油腻及刺激性食物。
2、若在服用时，不小心得了伤风感冒的患者应停止服用，如果患者怀孕了就要禁止服用。
3、定坤丹的主要成分中有属于马兜铃科植物的细辛，因而个别患者应在医生指导下服药并且要定期复查肾功能。
定坤丹是一种由许多中药制备成的中成药，一般贮存时间不宜过久。为了避免定坤丹潮湿、被虫蛀、和发霉烂掉变质，应将定坤丹置于室内阴凉干燥处，最好是室温为5～25℃，室内相对湿度在60～70%的环境下。
通过一种化学物质刺激法能了解到定坤丹还具有镇痛的作用。在试验前一小时，将定坤丹组的小鼠用灌胃法进行给药，每20g小鼠给定坤丹0.3g。把阿司匹林组的小鼠作为阳性对照，每只小鼠大约给药180mg/kg体重，同样用灌胃给药法。
空白对照组5-10分钟之间阵痛212次，每只平均阵痛17.7次。阿司匹林组5-10分钟之间阵痛81次，每只平均阵痛8.1次。定坤丹组5-10分钟之间阵痛80次，每只平均阵痛8.0次。定坤丹抑制阵痛次数，达到对照组的50%。
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