【关键词】原发性肝癌；CD4+CD25+T细胞；检测
肿瘤的发生、发展与机体的免疫监视机能密切相关。我门探讨 F癧患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞水平与肝癌的关系及其临床意 又-以及氩氦刀靶向局部消融治疗对其表达水平的影响。
1资料与方法
发性肝癌患者18例，男10例，女8例，年龄45~72岁，中位年龄，超提示瓣 lJl坏死;肝癌患者外周血CD4+CD25+T细胞数量与肿瘤临床病理的关系（％，又土s）;临床病理参数例数，CD4+CD25+T/CD4+T统计值P;性别男1015.0 土 2.10.2309>0.05;女815.2 土 1.4;年龄（岁）>60815.4 土 1.31.6085>0.05;<601014.6 土 0.8;AFP 浓度 Og/L）>5001315.7 土 2.32.1153<0.05;<500513.4 土 1.1;肿块大小（cm）<5716.1土2.02.7322<0.05,>51114.4 土 0.5;结节数量（个）>21015.4 土 1.60.9978>0.05;<2 ?814.6 土1.8;临床分期i/n1214.2 土1.63.0028<0.01;m616.7土1.8性疾病，60d内未接受化疗或者影响免疫功能药物。其中10例患者行 经皮穿刺氩氦刀靶向局部消融治疗。正常对照组：健康献血者15例， 其中男9例，女6例，年龄42?70岁，中位年龄55岁。
1.2试剂和仪器
PE标记的鼠抗人CD4, FIFC标记的鼠抗人0025单克隆抗体及同 型对照PE标记的鼠抗人IgG,，FITC标记的鼠抗人IgG,免疫球蛋白 购自法国A.COULTER公司。氩氦冷冻系统（CryocareTM surgical system）为美国Endocare公司产品，FACSAriaTM流式细胞仪为美国 BD公司产品。
1.3方法
分别采集肝癌患者、健康献血者、肝癌患者冷冻消融治疗前及治 疗后3个月外周静脉血2mL，肝素抗凝。FACSAriaTM流式细胞仪检测 CD/CD25+T细胞占CD4+T细胞总数的百分比。
1.4统计学方法
所有计量资料以均数±标准差表示，使用SPSS 11.0统计软件进行 方差分析及两两比较，组内前后比较用配对f检验，t<0.05为有统计学意义。
2结 果
2.1不同组别CD/CD^T细胞占CD4+T细胞总数的百分比的比较
18例肝癌患者与15例健康对照者外周血中CD4+CD25+T细胞占总 CD/T细胞的百分比分别为（15.1 ±1.6）%和（7.3±1.2）%,其差肝癌 患者外周血中CD4+CD25+T细胞的数量显著高与对照组u=15.56, >0.000）。
2.2肝癌患者外周血CD4+CD25+T细胞数量与临床病理各参数的关系 肝癌患者外周血CD4+CD25+T细胞数量与患者性别（f=0.23, P> 0.05）、年龄（f=1.61, P>0.05）和结节数量（t=1.00，p>0.05）无显著相 关，而与患者血清AFP浓度（<=2.16, P<0.05）、肿块大小（t=2.73， p<0.05）和临床分期（t=3.00，p<0.01）显著相关（表1）。
2.3肝癌患者冷冻消融治疗前后外周血CD/CDrl细胞数量的比较 冷冻消融治疗术后3个月外周血中CD4+CD25+T细胞占总CD/T细胞 数沾百分比为（11.3 ±1.4）%,与治疗前（14.5 ±1.6）%比较，治疗后外周 血CD/Ch/T细胞数量降低，差异有显著性（i=4.37,p<0.01）。
3讨论
肿瘤的发生、发展与机体的免疫监视机能密切相关。CD4+CD25+T 细胞是一个具有独特免疫调节功能的T淋巴细胞亚群，具有免疫无能 性和免疫抑制性等特点。前者表现为受抗原刺激后既不增生亦无
IL-2分泌等T细胞活化现象，后者表现为能抑制CD4\ CD8+T细胞、B 细胞及NK细胞的活化并可产生抑制性细胞因子如TGF- P和IL-10，负 性调节效应T细胞ra。许多肿瘤抗原为自身抗原，CD/ChJ细胞能抑 制T细胞对外来和自身抗原的免疫应答，因而在维持对自身成分耐受 的同时也导致肿瘤细胞的免疫逃避。
我门研究发现，肝癌患者外周血中CD4+CD25+T细胞占总CD/T细 胞的百分比比健康对照组高。引起这种变化的可能原因是肿瘤抗原 衍化因子诱导体内CD4+CD25+T细胞的分化或者对肿瘤抗原持续刺激 而引起的生理性防御反应[3]。本结果同时显示，肝癌患者外周血中 CD4+CD25+T细胞数量增高与患者性别、年龄。肿块的数量无明显相 关，而与血清AFP浓度、肿块大小和临床分期密切相关。提示随着肿 瘤细胞分裂增生，肿瘤负荷增多，其诱导体内CD4+CD25+T细胞分化数 量增多，使免疫细胞的活性被抑制。同时，由于机体免疫功能抑制 的加深更加有利于肿瘤的生长和转移而致疾病进展。我们还发现， 冷冻消融在减轻肿瘤负荷的同时也使患者外周血CD4+CD25+T细胞占总 CD4+T细胞的百分比降低。估计可能原因是冷冻消融一方面降低肿瘤 负荷，使肿瘤抗原衍化因子诱导CD/CDu4!'细胞分化减少，另一方面 肿瘤消融后释放或暴露出许多新的抗原，刺激机体NK细胞和CD；T细 胞升高，以及细胞因子INF-Y、TNF-P升高等Thl样反应偏移等免疫 反应w,使CDrCDrl/CD/T细胞比例降低。当然，有关肿瘤细胞如 何使CD/CD^/T细胞升高，CD4+CD25+T细胞与肿瘤的发展和预后的具 体关系待于今后进一步研究。
我们认为，肝癌患者体内CD4+CD25+T细胞增高，并且与肿瘤的负 荷、分期和病程相关。检测肝癌患者外周血中CD4+CD25+T细胞可作为 患者荷瘤状况和疗效评估方法之一。清除CD4+CD25+T细胞或者下调其活性可成为一种新的肿瘤免疫治疗方法。
文章由福冠堂新特药在线（www.fuguantang.com）整理发布