2019年2月20日,& mdash嵌合抗原受体T (CAR-T)细胞疗法在血液肿瘤患者中产生了显著的疗效。然而,该领域的挑战之一是缺乏一种简单有效的方法来检测免疫效应细胞上的CARs。
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最近,南加州大学凯克医学院的研究人员开发了一种基于荧光素酶的新方法(称为Topanga试验),用于检测T细胞上CARs的表达。该方法利用了一种叫做Topanga试剂的重组融合蛋白,由CAR靶标的胞外结构域和海洋荧光素酶或其衍生物组成。
这种方法包括用托潘加试剂孵育表达CAR的细胞,洗涤几次并进行荧光检测。该方法可以检测基于免疫球蛋白或非免疫球蛋白抗原结合域的CARs。
研究人员还发现,在Topanga试剂中添加表位标签不仅可以实现一步纯化过程,还可以使这种试剂通过流式细胞仪检测CARs细胞。同时,含有分泌的Topanga试剂的上清液可直接用于生物发光检测或流式细胞术检测,无需任何蛋白质纯化。
基于此,研究人员认为Topanga试验是一种高灵敏度、高特异性、方便、经济、多功能的检测CARs的新方法。
接下来,研究人员计划研究Topanga试验是否可用于监测CAR T细胞注射到患者体内后的扩增和维持情况。如果能够实现,不仅可以帮助医生找出可能因细胞扩增过快而发生毒性反应的患者,还可以帮助患者找出可能因CAR-T细胞存在时间过短而发生癌症复发的患者。(Bioon.com生物谷)
参考文献:
Preet M. Chaudhary等.一种基于荧光素酶的检测嵌合抗原受体的新方法.《科学报告》(2019年)。DOI:10.1038/s 14598-018-38258-z